色谱柱使用的一般注意事项

1. 色谱柱各部分名称2. 色谱柱规格和使用条件色谱柱规格和使用条件请参照产品的色谱柱使用说明。

色谱柱使用说明请在Shodex官方网站点击色谱柱使用说明下载进行下载。

色谱柱使用说明下载链接3. 流动相的配制(1)流动相请充分脱气防止有气泡。(2)流动相中含有不溶的杂质可能会导致色谱柱性能下降和色谱图噪声，因此请使用滤膜(0.45 μm)过滤流动相。注意使用水时，请使用超纯水装置新配制的水或者刚开封的HPLC级蒸馏水。使用有机溶剂时，请使用HPLC级以上的试剂。使用品质不同的有机溶剂时，使用前请确认其品质适合分析。开封时间长的有机溶剂可能有性质改变、吸湿、污染的问题，请不要使用。注意请勿使用已长时间保存的流动相，组成的变化可能导致洗脱行为的变化和色谱柱的劣化。参考建议使用具有在线脱气功能的脱气机。4. 样品的配制(1)尽量使用流动相溶解和稀释样品。如果难以溶解在流动相中，请尽量和流动相组成接近。对于梯度洗脱，建议使用初始流动相配制样品。(2)为了防止由于颗粒物（不溶物）的堵塞导致色谱柱变差，劣化或性能变差，请使用滤膜(0.45 μm)过滤样品。注意样品使用非流动相溶剂溶解时，如果含有不溶于流动相的物质，可能会产生进样后堵塞色谱柱的情况。注意如果样品浓度过高，过量进样可能导致色谱柱无法发挥原有性能，造成峰型异常、分离不良或再现性不好等情况。如有这种情况，可以稀释样品溶液或者减少进样量进行调整。参考为了保护分析柱，建议使用保护柱。保护柱可保持分析柱的性能，并没有提高分离性能的作用。5. 色谱柱的安装(1)安装色谱柱前请先将设备中的流路充分洗净，完全置换成流动相。另外，请切换阀清洗并置换进样器的流路（进样环）。置换不互溶或溶解性低的溶剂时，先使置换成双方溶剂都能互溶的溶剂，再置换成使用溶剂。注意色谱柱不能使用的溶剂在流路中残留可能会造成色谱柱的劣化。注意流动相组成发生显著变化，可能造成泵、管路中的污垢脱落，可能会造成色谱柱的劣化。 (2)查看色谱柱身标签，然后将色谱柱连接到设备，使流动相沿流动方向（➡）流动。使用保护柱时，请依次先连接保护柱，再连接分析柱。(3)请一边按住配管一边拧紧色谱柱的末端接头，防止配管和末端接头中产生空隙。空隙会造成样品的扩散，导致色谱峰变宽。(4)将流速设置为小于正常流速一半的流速然后开始送液。在升温使用色谱柱时，以低流送液直到达到设定温度，然后逐渐将流速增加到所需流速。警告请检查溶剂是否泄露。否则可能会造成漏电、腐蚀或化学损坏。注意色谱柱连接到仪器上时，请避免气泡进入色谱柱，否则可能造成色谱柱劣化。注意当连接色谱柱或从停泵状态开始送液时，以小于正常流速一半的流速送液，压力突然升高可能会使色谱柱劣化。注意色谱柱升温使用后，请使用小于正常流速一半的流速继续送液至色谱柱回复室温后再停泵。如果在色谱柱温度很高时停止送液，当流动相温度降低时发生收缩会造成色谱柱内部空隙，使色谱柱劣化。参考建议设置泵的报警压力，以避免超过最大可用压力。6. 流动相的置换置换流动相时，请以小于正常流速一半的流速通液3 ~ 5倍的柱体积。(1)请事先确认柱中溶剂与要置换的溶剂是否互溶。置换不互溶或溶解性低的溶剂时，先置换成双方溶剂都能互溶的溶剂，再置换成使用溶剂。(2)在进行梯度洗脱时，由于流动相成分的变化，在梯度洗脱过程中柱压可能超过最大可用压力。调整流速和柱温，使其不超过最大可用压力。7. 色谱柱清洗方法流路或者样品中有不溶物质或者吸附性物质残留在色谱柱内，可能会影响色谱柱的洗脱及压力的变化，这种情况清洗色谱柱可能有改善效果。

使用保护柱时，请先去除保护柱进行检测，如果效果改善了，则可能是保护柱的原因，请清洗保护柱。

如果去除了保护柱仍然没有改善，请清洗保护柱和分析柱，请注意把保护柱和分析柱分开清洗。另外，几根色谱柱串联使用时，请分开清洗。清洗色谱柱时，请不要连接检测器，流动相从色谱柱流出后直接流入废液缸即可。

如果清洗色谱柱后仍未改善，请更换新的色谱柱。

【清洗方法】(1)如果不溶物堵在色谱柱入口，可以逆接色谱柱并以小于正常流速一半的流速通流动相来将其除去。(2)其他的清洗方法请参考各产品的使用说明书。注意清洗液长时间保留在色谱柱中可能会造成色谱柱提前劣化，色谱柱清洗后请尽快更换成流动相。8. 色谱柱的保存置换成出厂时的储存溶剂，从装置中卸下色谱柱并拧紧两端堵头，在温度变化小的阴凉处储存。注意色谱柱内绝对不能干燥，否则可能导致色谱柱劣化。9. 色谱柱的检定方法检定方法请参照产品的出厂检测报告(CERTIFICATE OF ANALYSIS)。Shodex采用「半峰宽法」测定理论塔板数，采用非对称系数(Fas)作为峰对称性指标。

出厂检测报告请在Shodex官方网站点击出厂检测报告下载进行下载。下载时需要输入产品序列号。

出厂检测报告下载链接

注意理论塔板数和Fas根据样品及分析条件的变化会有较大差异。在检定色谱柱出厂性能的时候，请根据出厂检测报告记载的条件进行测试。10. 色谱柱的废弃方法通常实验中使用的色谱柱应根据当地政府的规定，作为工业废弃物进行处置。11. 其它注意事项(1)请勿对色谱柱施加敲击，掉落等强烈冲击。(2)请按照各地废弃物标准正确废弃旧的产品。